1.  引言

帕金森病 (PD) 是一種進行性神經(jīng)退行性疾病，其主要病理特征為中腦黑質(zhì)致密部多巴胺( dopamine，DA) 能神經(jīng)元進行性變性丟失，導(dǎo)致紋狀體 DA 水平下降充分發揮，在臨床上主要表現(xiàn)為靜止性震顫舉行、運動遲緩應用領域、肌強直和姿勢平衡障礙等癥狀功能。 

PD 的病因?qū)W具有多因素面向，包括氧化應(yīng)激和腦鐵失調(diào)重要意義。目前的化學(xué)療法基本上是使用外源性左旋多巴 (LD)（DA 的直接前體）作為藥物進行對癥治療問題。然而，LD 給藥與三個重要問題有關(guān)：

① LD 代謝可產(chǎn)生細胞毒性自由基效率，破壞尚未受損的黑質(zhì)紋狀體的多巴能神經(jīng)元，可加速帕金森病的發(fā)展；

② LD 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生物利用度較低十大行動；

③ 在長期治療期間重要性，給藥后 LD 的血藥濃度波動明顯，進而導(dǎo)致大腦內(nèi)突觸間隙的多巴胺水平波動劇烈體系，對突觸后多巴胺受體造成脈沖樣刺激系統穩定性，從而導(dǎo)致運動并發(fā)癥的出現(xiàn)。

為了克服這些問題多種場景，最近合成了一種含有 LD 和天然硫辛酸部分（LA）的多功能前藥（LD-LA科技實力，圖 1）。硫辛酸很容易穿過血腦屏障 ( BBB ) 并在神經(jīng)元中積累集中展示，具有抗氧化和鐵螯合特性可靠保障，可以減少兒茶酚胺的自動氧化（由過渡金屬加速）和清除 LD 代謝產(chǎn)生的 ROS 。 

LD-LA 對帕金森病癥狀的活性及其抗氧化效率已通過體外和體內(nèi)研究得到證明建設。此外共同，與 LD 相比，口服 LD-LA 延長了 LD 血藥濃度，因此這種前藥在治療與 LD 血漿水平波動直接相關(guān)的運動并發(fā)癥特別有益在此基礎上。然而，LD-LA 兒茶酚酯和酰胺鍵在化學(xué)和酶促作用下均被裂解，導(dǎo)致血漿半衰期約為 50 分鐘開展。因此帶動擴大，每天需要多次給藥以保持 LD 的有效腦水平。

在目前的工作中強大的功能，將不穩(wěn)定的前藥 LD-LA 包埋在可生物降解的聚合物微球中積極拓展新的領域，以保護該前藥免受酶促和化學(xué)降解充分發揮，并獲得完整化合物的持續(xù)釋放與時俱進。聚乳酸-羥基乙酸( PLGA ) 具有良好的生物相容性和可生物降解性，用于制備載有前體藥物的微粒解決方案。因此更優質，它已被用于開發(fā)低分子量化合物以及治療性蛋白質(zhì)和質(zhì)粒 DNA 的持續(xù)藥物制劑。

由于 LD-LA 的親脂特性空白區，PLGA 微球采用水包油乳液/溶劑蒸發(fā)法配制貢獻法治。研究了配方和加工參數(shù)對微球特性（大小、負載應用優勢、釋放）的影響相對較高。還強調(diào)了藥物釋放前后的穩(wěn)定性以及控制 LD-LA 釋放的潛在傳質(zhì)機制。

4.  儀器設(shè)備

AccuSizer顆粒計數(shù)器

品牌：美國PSS（Entegris）發展需要，AccuSizer A7000系列

原理：單個粒子通過狹窄的光感區(qū)時阻擋了一部分入射光創新內容，引起到達檢測器的入射光強度瞬間降低，強度信號的衰減幅度理論上與粒子橫截面(假設(shè)橫截面積小于光感區(qū)的寬度)信息，即粒子直徑的平方成比例實踐者。用標(biāo)準(zhǔn)粒子建立粒徑與強度信號大小的校正曲線。儀器測得樣品中顆粒通過光感區(qū)產(chǎn)生的信號廣泛關註，根據(jù)校正曲線計算出顆粒粒徑豐富。PSS（Entegris）的SPOS單粒子光學(xué)傳感技術(shù)，通過光散射增加對小粒子的靈敏度顯示，將單顆粒傳感器的計數(shù)下限拓展至0.5μm善於監督。A7000AD 采用自動稀釋模式，可有效將高濃度樣品快速稀釋至合適濃度并進行檢測豐富內涵。

檢測關(guān)鍵點：濃度數據、稀釋液/分散液性質(zhì)、流速深入實施。

原理圖	儀器外觀

3.  樣品制備及表征

通過油包水乳液/溶劑蒸發(fā)技術(shù)(O/W應用提升，ESE)制備了LD-LA PLGA微球(Wischke和Schwendeman，2008)業務指導。簡單地說新品技，將 PLGA 和 LD-LA 以不同的濃度和藥物/聚合物比例(PLGA/mL DCM 為200、400、800 mg/mL DCM保持穩定；藥物/聚合物比例為2%就此掀開、5%或20%(w/w))溶解在DCM中，可制得 0.5 mL的油相。

對于聚合物濃度較高的溶液總之，在室溫下超聲處理 30 min。使用均質(zhì)機生產製造，將 o-ph 與含 PVA 2%(w/w)的水相( aq-ph )乳化(30 s拓展基地，室溫，25000分鐘)多元化服務體系。將得到的乳液滴入PVA水溶液(0.5% (w/w))中;2.5 或 5 ml)處理，硬化浴( hb )，在室溫下磁力攪拌兩小時實力增強，使DCM蒸發(fā)和微球凝固自然條件。或者，在不稀釋的情況下攪拌乳液(表1)體系流動性。在室溫(3min，3000×g)下離心收集微球深度，然后用水洗兩次助力各行，用液氮迅速冷凍，冷凍一夜進行干燥重要工具。

使用 AccuSizer A7000 AD 對微球粒徑分布進行表征分析將進一步，使用顯微鏡掃描電鏡（SEM）對 AccuSizer 測量的微球粒徑大小結(jié)果進行佐證。

4.  實驗結(jié)果

該實驗考察了配方參數(shù)(聚合物在有機溶劑中的濃度提供有力支撐、相體積比實際需求、有機溶劑蒸發(fā)速率)對微球粒徑大小的影響。表 1 顯示發展成就，PLGA 濃度的增加導(dǎo)致微球尺寸和多分散性增加(例如比較 F2 和 F4)性能。這些現(xiàn)象可歸因于油相粘度的增加導(dǎo)致攪拌效率的降低，從而產(chǎn)生多分散和更大的乳化液滴優勢，從而產(chǎn)生尺寸范圍相當(dāng)寬的微球設計。

為獲得可儲存的注射劑，通常粒徑范圍控制在20-100 μm品率，上述所有的配方都達到目標(biāo)粒徑范圍善謀新篇。微球的多分散性與乳液基的制備技術(shù)相關(guān)。Accusizer 測量（圖 2）表明開展面對面，使用 200 mg PLGA/mL 的 DCM 溶液制備的微球具有相當(dāng)窄的粒徑分布供給，而隨著聚合物濃度的增加 (800 mg/mL)，粒徑范圍變寬。 

使用具有高 PLGA 濃度 (800 mg/mL) 的 DCM 溶液制備的顆粒是無孔的拓展應用，且與 AccuSizer 數(shù)據(jù)（圖 2）一致非常重要，顯示出相當(dāng)寬的粒徑分布（圖 3，F(xiàn)8）取得明顯成效。

5.  結(jié)論

關(guān)鍵配方和加工參數(shù)會影響微球的粒徑大小和孔隙率基地，從而影響藥物釋放速率。有機相中的聚合物濃度大力發展、相體積比和水相與有機溶劑的預(yù)飽和度對攪拌效率和油滴凝固速率具有重要影響約定管轄，從而影響微球粒徑大小、多分散性和孔隙率提單產。使用AccuSizer A7000 系列可快速核心技術、準(zhǔn)確測量粒徑大小和粒徑分布、從而篩選配方設計，節(jié)省研發(fā)時間。

參考資料

[1] E. D’Aurizio, C.F. van Nostrum, M.J. van Steenbergen, P. Sozio, F. Siepmann, J. Siepmann,W.E. Hennink, A. Di Stefano至關重要；Preparation and characterization of poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres loaded with a labile antiparkinson prodrug.